Ce cours apparaît dans les formations suivantes :
• Junia ISA > Licence 3 Environnementaliste (ISA/FGES) > 1er semestre > 3,00 ECTS

Pré requis

L’étudiant doit notamment savoir :
- Citer et présenter la structure chimique type des monomères constitutifs des différentes familles de biomolécules (glucides, protéines, lipides et acides nucléiques).
- Présenter les propriétés chimiques réactionnelles de base des monomères constitutifs et les liaisons essentielles créées au cours de la formation des biomolécules.
- Savoir différencier les cellules eucaryotes et procaryotes. Différencier, décrire les organites intracellulaires et définir leur(s) fonction(s) ;
- Connaître les processus de réplication, transcription, traduction et la mitose.
De plus, l’étudiant doit avoir acquis des notions de base en physique (notions de force) et chimie générale (notamment pH métrie).

Objectifs du cours

L’étudiant devra pouvoir :
- Citer, exposer et expliquer le principe et le(s) intérêt(s) des méthodes de base utilisées en biochimie, cytologie et immunologie.
- Analyser et interpréter des résultats simples obtenus par ces méthodologies.
- Comprendre et s'adapter à la théorie de nouvelles méthodologies dans ces mêmes domaines scientifiques.

Contenu du cours

Chapitre I :
Chapitre II : METHODES SPECTROSCOPIQUES
1) Rappels.
2) Spectrométrie d’absorption moléculaire.
3) Photométrie des milieux troubles.
4) Fluorimétrie ou spectroscopie de fluorescence.
5) Spectrométrie de masse.


Chapitre III. TECHNIQUES DE SEPARATION
A) Techniques préparatives d’échantillons à analyser.
1) Fractionnement cellulaire et homogénéisation.
2) Centrifugations et ultracentrifugations.
3) Dialyse.
4) Filtration.
5) Séparation par extraction.
6) Précipitation sélective des protéines.

B) Méthodes électrophorétiques.
1) Principe.
2) Facteurs limitants la migration.
3) Applications pratiques : électrophorèse sur gel d'agarose, SDS-PAGE, Isoélectrofocalisation, 2D-PAGE.
4) Mise en évidence des molécules séparées par électrophorèse.

C) Méthodes chromatographiques.
1) Définition et but.
2) Les différents types de chromatographie.
3) Les dispositifs chromatographiques.
4) Chromatographie par tamisage moléculaire.
5) Chromatographie par échange ionique.
6) Chromatographie de partage.
7) Chromatographie d’affinité.
8) Chromatographie d’adsorption.
9) Chromatographies en phase gazeuse.
10) Chromatographie liquide à haute performance HPLC.

Chapitre IV. METHODES IMMUNOLOGIQUES.
A) Rappels d’immunologie.
1) Définition, Historique.
2) Les moyens de défense.
3) Immunogène, Antigène.
4) Déterminant antigénique ou épitope.
5) Les anticorps : structure de base.
6) Interaction paratope / épitope ; antigène/anticorps.

B) Obtention de réactifs immunologiques
1) Préparation des antigènes.
2) Les méthodes d'immunisation.
3) Obtention d’anticorps polyclonaux polyspécifiques et monospécifiques.
4) Obtention d’anticorps monoclonaux.

C) Les méthodes immunochimiques.
1)Techniques d’immunoprécipitation (immunodiffusion).
2) Les techniques d’agglutination.
3) Les techniques utilisant le marquage des Anticorps ou des antigènes.

Modalités d'enseignement

Organisation du cours

Méthodes pédagogiques

• Cours magistral
• Travaux pratiques

Évaluation

1DS (2h) + 1 compte-rendu de TP + 1 examen (1h30)